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技術文章

慢性壓力對大腦健康的影響
更新時間:2024-02-23   點擊次數(shù):483次

1.簡介
壓力是一種普遍存在的現(xiàn)象,可以給人類日常生活帶來眾多的生理和心理變化。當生物體遇到可能危及生命的情況時,它們會承受壓力。因此,這些生物體會啟動各種生理過程,以維持生存和抵抗壓力的穩(wěn)態(tài)。盡管生物體能夠適應壓力,但慢性壓力可能會對行為和神經(jīng)生物學功能產(chǎn)生有害影響。許多研究表明壓力與精神障礙之間存在關聯(lián)。因此,需要進行研究來闡明壓力對大腦健康和壓力引起的精神疾病的影響。

慢性不可預測性壓力(CUS)于 1982 年提出,用于系統(tǒng)探索重度抑郁癥(MDD)的神經(jīng)生物學基礎。它的利用使得能夠檢查中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中壓力引起的神經(jīng)生物學改變,以及評估抗抑郁藥及其潛在候選藥物的藥理功效。 在本研究中,我們建立了一個新的包含外源性皮質酮暴露(CUS+C)的CUS模型,并用它來研究壓力和外源性皮質酮共同暴露對大腦的影響。

2.材料和方法
使用成年雄性小鼠,并讓小鼠在飼養(yǎng)設施中適應環(huán)境2周,然后承受壓力。評估七個小鼠身體區(qū)域(頭部、頸部、背部、腹部、前爪、后爪和尾巴)的皮毛狀態(tài)。另外,進行不含BrdU染色和BrdU染色分析,以及進行腦組織樣本的總蛋白質含量評估。并且,還有行為學分析,包括拼圖盒測試、旋轉測試、懸尾測試、強迫游泳測試、新物體識別等行為分析。本研究中使用相機對懸尾測試、強迫游泳測試、新物體識別拍攝并獲得視頻,使用動物運動軌跡跟蹤系統(tǒng)對視頻進行相應分析。

動物運動軌跡跟蹤系統(tǒng)是一款應用廣泛的視頻跟蹤軟件,可以跟蹤和分析任何動物的行為,運動軌跡和活動。系統(tǒng)提供大量參數(shù),幫助您對實驗結果進行深入分析,包括行進距離、在某個區(qū)域花費的時間(例如高架十字迷宮的開放區(qū)域花費的時間,可用于衡量焦慮相關的反應)、位置、路徑形狀以及更多相關參數(shù)。您可以通過多種方法將結果可視化呈現(xiàn),例如圖表、圖形、軌跡熱像圖等。


3.結果
3.1. CUS+C引起成年小鼠身體和大腦重量以及皮毛狀態(tài)的變化
在本研究中,我們首先評估了 CUS+C 模型引起的小鼠身體狀況的變化。我們觀察到與對照組相比,CUS+C 組的體重顯著下降(圖 1A、B)。我們還觀察到CUS+C組的腦重量明顯小于對照組(圖 1CD)。此外,CUS+C組表現(xiàn)出不規(guī)則且不受調節(jié)的皮毛狀態(tài),其得分顯著高于對照組(圖1E、F)。這些發(fā)現(xiàn)表明,CUS+C模型對測試成年小鼠的身體和大腦生長產(chǎn)生負面影響,并抑制自我護理行為。

圖1

3.2. CUS+C引起成年小鼠抑郁樣行為和記憶功能障礙
通過強迫游泳和懸尾實驗來確定CUS+C模型是否引起小鼠出現(xiàn)抑郁樣行為。 值得注意的是,強迫游泳測試顯示CUS+C組小鼠的不動時間明顯高于對照組(圖 2A)。同樣,在尾部懸掛測試中,我們觀察到CUS+C小鼠的不動時間明顯高于對照小鼠(圖 2B)。 這些結果表明,我們的CUS+C模型可能在成年小鼠中誘導抑郁樣行為。

為了分析每組小鼠的記憶功能,我們進行了拼圖盒和旋轉棒測試,然后比較了各組小鼠的認知靈活性和學習能力。我們的拼圖盒測試結果表明,CUS+C 組在T5、7、89時到達目標框的延遲時間顯著高于對照組(圖 2C)。此外,在轉棒測試的所有試驗中,觀察到 CUS+C小鼠從轉鼓上掉落的速度明顯快于對照小鼠(圖 2D)。此外,將小鼠暴露于兩個相同的物體10分鐘,6小時后,其中一個物體被新物體取代。然后讓小鼠再觀察這兩個物體10分鐘。對于對照組,觀察到與熟悉的物體相比,對新物體的探索時間和接近度更高。對于CUS+C組,兩個物體之間的探索時間和接近度沒有顯著差異(圖 2E-G)。這些結果表明,CUS+C模型對成年小鼠的認知功能、記憶學習能力以及運動學習功能產(chǎn)生負面影響。

圖2


3.3. CUS+C減少成年小鼠大腦中的成年海馬神經(jīng)發(fā)生
我們通過免疫熒光評估了CUS+C模型導致的海馬神經(jīng)發(fā)生的變化。CUS+C組小鼠齒狀回Ki-67陽性細胞數(shù)量顯著低于對照組小鼠齒狀回(圖3A、B)。同樣,CUS+C 組齒狀回中BrdU陽性細胞數(shù)量顯著低于對照組(圖 3A、C)。這些結果表明,我們的CUS+C模型對成年小鼠大腦海馬體的祖細胞產(chǎn)生負面影響。

圖3


3.4. CUS+C顯著減少成年小鼠大腦海馬星形膠質細胞數(shù)量
在這項研究中,我們比較了不同組小鼠皮質區(qū)和海馬體中腦源性細胞(神經(jīng)元、星形膠質細胞和小膠質細胞)的密度。研究發(fā)現(xiàn)CUS+C小鼠海馬區(qū)的GFAP陽性細胞數(shù)量顯著低于對照小鼠海馬區(qū);在皮質區(qū)域沒有觀察到這種差異(圖 4A-E 和圖S4A、B)。此外,與對照小鼠大腦中的水平相比,CUS+C小鼠大腦中的GFAP蛋白表達水平顯著降低(圖4F、G)。這些結果表明 CUS 模型引起成年小鼠大腦中海馬星形膠質細胞的丟失。

圖4

圖S4


4.討論
慢性壓力是一個普遍而復雜的問題,會導致各種精神和身體健康障礙。我們開發(fā)了一種新的 CUS+C模型,評估了這種新模型對大腦健康的影響。在這項研究中,CUS+C模型破壞了成年雄性小鼠正常的身體重量和大腦重量增加,并惡化了皮毛狀態(tài)和抑郁樣行為。這些結果表明,CUS+C模型對成年小鼠的身體狀況、大腦健康和自理能力產(chǎn)生負面影響。

抑郁癥和記憶力缺陷之間存在顯著關系。我們通過進行各種行為測試來評估記憶功能,結果顯示,CUS+C會損害認知、學習以及運動學習記憶。壓力引起的不良行為影響需要持續(xù)的壓力反應,從而阻止動物進行調整。因此,將外源性皮質酮暴露納入一般CUS模型可能有助于通過使小鼠保持一致的壓力反應狀態(tài)來防止壓力適應。

在齒狀回中,顆粒細胞神經(jīng)發(fā)生持續(xù)很長一段時間,從胚胎階段到成年期。齒狀回的成年神經(jīng)發(fā)生受到環(huán)境因素的高度調節(jié),這意味著壓力事件可能會影響這一過程。據(jù)觀察,成人海馬體的神經(jīng)發(fā)生過程與認知功能和記憶表現(xiàn)有關。暴露于早期生活壓力的成年大鼠也被證明表現(xiàn)出海馬神經(jīng)發(fā)生的減少和空間學習能力的惡化。我們的研究結果也表明,CUS+C模型對成人海馬神經(jīng)發(fā)生的抑制可能導致認知功能障礙和記憶障礙。

星形膠質細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)膠質細胞,表現(xiàn)出復雜且多方面的形態(tài),具有原生質和纖維亞型。在這項研究中,CUS+C模型中成年小鼠海馬區(qū)星形膠質細胞丟失,但沒有引起神經(jīng)元和小膠質細胞丟失。此外,CUS+C模型下調了小鼠大腦中GFAP(一種典型的星形膠質細胞標記物)的蛋白表達水平。對海馬星形膠質細胞作用的研究表明,海馬星形膠質細胞在記憶形成和維持中發(fā)揮著重要作用。綜上所述,我們的結果表明,CUS+C 模型導致的海馬星形膠質細胞數(shù)量下降可能會導致成年小鼠的記憶功能障礙。

5.結論
在這項研究中,我們的結果表明,將成年小鼠置于CUS+C模型中會導致身體重量和大腦生長減弱、皮毛狀態(tài)退化和抑郁樣行為。此外,該模型的使用破壞了成年小鼠的學習記憶、運動學習記憶和認知能力,同時還抑制了海馬神經(jīng)發(fā)生和海馬星形膠質細胞的損失。這項研究揭示了不同壓力條件和外源性皮質酮暴露對大腦健康的協(xié)同影響。

參考文獻
Shin H S, Lee S H, Moon H J, et al. Prolonged stress response induced by chronic stress and corticosterone exposure causes adult neurogenesis inhibition and astrocyte loss in mouse hippocampus[J]. Brain Research Bulletin, 2024: 110903.


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